Chromatografie na tenké vrstvě, vliv polarity rozpouštědla na dělení látek

Princip: Chromatografie je dělící metoda, při níž dochází k oddělování jednotlivých složek na základně různé rozpustnosti mezi fází stacionární a mobilní (pohyblivá). V našem případě je stacionární fází silufol=hliníková fólie s vrstvou silikagelu. Mobilní fází jsou organického rozpouštědla. Kvalitu rozdělení udává tzv. retardační faktor RF=a/b…(a= vzdálenost skvrny od startu, b= vzdálenost čela od rozpouštědla)

Pomůcky a chemikálie:        mikropipety, kádinky, hodinové skla, fenol, pyrogalol, hydrochinon, rezorcinol, chlorid železitý v rozprašovači, rukavice,etanol, amoniak,silufolové kartičky,tužka
Postup:                   1) Ustřihneme potřebný kus fólie Silufol (silikagel se škrobem jako pojivem) naneseme mikropipetou roztoky jednotlivých fenolů (5-10mm3): 1% ních roztoků rezorcinolu, fenolu, hydrochinonu a pyrogalolu v etanolu ve formě skvrn o průměru asi 3mm. Skvrny musí být vzdáleny asi 2cm od dolního okraje a 1,5-2cm od sebe navzájem.
2) Pak umístíme fólie do komory nasycené parami rozpouštědla. Jako komoru použijeme kádinku přikrytou hodinovým sklem.
3)  Start s nasycenými látkami nesmí být do rozpouštědla ponořen.
4) Rozpouštědlo bude vzlínat a postupně unášet látky od startu.
5)   Čelo rozpouštědla necháme dojít asi 2cm od horního okraje, fólii vyjmeme, polohu čela si zaznamenáme a necháme rozpouštědlo odpařit na vzduchu.
6)   Pak provedeme detekci roztokem chloridu železitého v etanolu, který naneseme rozprašovačem.
7)   Potom ještě necháme krátce působit páry amoniaku .
8)   Objeví se žluté až temně hnědé skrvny jednotlivých fenolů a vypočítáme RF.


fenol
pyrogalol
hydrochinol
rezorcinol
B:A - 1:1
0
1
1
1
B:A – 1:2
0
1
1
1
B:A – 2:1
0
1
1
1
Benzen
0
2,5
1,4
3,5
Aceton
0
1
1
1
 b=6
RF=
pyrogalol: RF=  0,4167
hydrochinol:RF= 0,2333
rezorcinol:RF= 0,5833

ukázka silufolové kartičky

potřebné pomůcky


nanášení mobilní fáze

silufolové kartičky v komoře s rozpouštědly

vzlínání benzenu

odpaření rozpouštědla

Nanášení chloridu železitého

Vlevo- nevyvzlínaní látky(špatný výsledek)
Vpravo-správně vyvzlínané látky(vzorový výsledek)

Žádné komentáře:

Okomentovat